在RoHS 2.0邻苯二甲酸酯(DEHP、DBP、BBP、DIBP)检测中，高效液相色谱仪(HPLC)的分离效果直接受流动相组成影响。优化流动相是提升分离度、缩短分析时间的关键。
邻苯为弱极性化合物，通常采用反相色谱柱(C18)，流动相由水相(A)与有机相(B)组成。常用有机相比例为甲醇或乙腈。研究表明，乙腈体系比甲醇具有更低粘度和更高洗脱强度，可获得更尖锐峰形和更好分离度，尤其对结构相近的DBP与DIBP。典型梯度程序：初始60%乙腈，5分钟内升至90%，保持3分钟洗脱。
缓冲盐的添加亦不可忽视。加入5–10 mM乙酸铵可抑制邻苯在硅胶表面的次级相互作用，减少拖尾，提升峰对称性。但浓度过高易堵塞系统，且需使用质谱兼容盐类。
此外，pH控制影响不大(邻苯无电离基团)，但水相纯度至关重要——杂质可能干扰低浓度目标物检测。建议使用HPLC级溶剂，并在线脱气。
实验表明，将甲醇替换为乙腈后，四种邻苯的分离度(Rs)从1.2提升至1.8以上，全部满足IEC 62321-8:2017要求(Rs≥1.5)。同时，优化后的梯度可将分析时间从15分钟压缩至8分钟，显著提升通量。
综上，流动相选择需综合考虑分离效率、系统压力、检测灵敏度及法规符合性，通过系统性梯度试验确定较佳配比。
