液相色谱仪的故障处理及注意事项

　　原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。

　　处理过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中12～36 小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开p urge 键，清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1. 0～3. 0ml/ min，纯水冲洗过滤器1 小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀，纯甲醇冲洗半小时即可。

　　故障2

　　柱压高原因⑴缓冲液盐分如(乙酸铵等) 沉积于柱内; ⑵样品污染沉积。

　　处理对于*种情况先用40～50 ℃的纯水,低速正向冲洗柱子，待柱压逐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30 分钟; 对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)，再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。 
　　故障3

　　既无压力指示，又无液体流过[1 >;。

　　原因⑴泵密封垫圈磨损; ⑵大量气泡进入泵体。

　　处理对于*种情况，更换密封垫圈;对于第二种情况，在泵作用的同时，用一个50ml 的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。

　　故障4

　　压力波动大，流量不稳定.

　　原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物，使得两者不能密封。

　　处理工作中注意观察流动相的量，保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底，避免吸入空气，流动相要充分脱气[2 >;。如为单向阀和阀座之间夹有异物，拆下单向阀，放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗.

　　故障5

　　出峰不佳，峰分叉。

　　原因⑴色谱柱被污染; ⑵柱头填料塌陷。

　　处理对于*种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)，再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳，则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料)，装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平[2 >;。柱头用甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30 分钟以上。

　　故障6

　　峰面积重复性不佳。

　　原因⑴进样阀漏液; ⑵加样针不到位。

　　处理对于*种情况更换进样阀垫圈; 对于第二种情况保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJ EC T 状态，以保证进样量的准确。日常工作中，液相色谱仪的保养非常重要，如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液，每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净，防止无机盐析出或沉积; 样品的前处理也很重要，任何样品都要尽可能地去除杂质，*溶解，尽量减少对色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，同时避免注射过浓的样品溶液，以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞; 色谱柱作好标记，用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

　　注意事项

　　1) 流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

　　2) 柱子是非常脆弱的，*次做的方法，先不要让液体过柱子。

　　3) 所有过柱子的液体均需严格的过滤。

　　4) 压力不能太大，不要超过150kgf/cm2 .

　　5) 因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。